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如何检测细胞培养瓶中的细菌内毒素
发表日期:2023-01-13

细胞培养试验对环境、耗材等有严格的要求,如果细胞培养瓶中含有细菌内毒素,将影响细胞的生长甚至导致死亡。那么,我们该如何检测细菌内毒素呢?

细菌内毒素是革兰氏阴性菌的细胞壁成分,当细菌死亡或自溶后便会释放出内毒素。是G-菌细胞壁个层上的特有结构,内毒素为外源性致热原,它可激活中性粒细胞等,使之释放出一种内源性热原质,作用于体温调节中枢引起发热。

如何检测细胞培养瓶中的细菌内毒素_富道细胞

检测细胞培养瓶中是否含有细菌内毒素可以听过内毒素检测鲎试剂盒来检测,它是利用人工合成的显色基质使鲎试剂产生的显色反应定量检测内毒素。在适宜的条件下(温度,pH值及无干扰物质),细菌内毒素激活C因子,引起一系列酶促反应,激活凝固酶原形成凝固酶,凝固酶分解人工合成的显色基质,使其分解为多肽和黄色的对硝基苯胺(pNA,λmax = 405nm) 。在一定时间内,pNA的生成量与细菌内毒素浓度成正相关,据此,可以定量供试品的内毒素浓度。

以上是检测细胞培养瓶中细菌内毒素的方法,确保耗材无细菌内毒素是衡量其质量的一项重要指标,也是保证后期细胞正常生长的关键因素。

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