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细胞工厂中如何避免细胞抱团生长
发表日期:2022-10-17

首先我们需要明确一点,细胞工厂中如果出现抱团情况不一定代表生长不好。如果轮廓清晰,可以清楚地看到一个个细胞,说明细胞正在分裂。然而,大部分细胞抱团都表示细胞的生长出现了问题,其原因可能来自以下几个环节:

细胞消化:细胞是非常脆弱的,如果消化时吹打太用力、消化液太强或有毒性等容易导致细胞死亡,进而释放DNA,形成黏性的细胞团。细胞消化不完全,细胞间的连接没有分开;细胞消化过度,圆形的细胞容易聚堆,再分开很困难。

操作建议:消化细胞的过程要轻柔,切忌用力拍打培养瓶的侧壁;对于贴壁较牢的细胞,建议分批多次消化,降低胰酶对细胞的损伤。培养前充分了解细胞的特性,确定细胞的最佳消化时间。

细胞工厂中如何避免细胞抱团生长_富道细胞

细胞传代:细胞传代时吹打不均匀,没有将细胞团吹散;细胞离心速度过大或者离心时间过长;传代时间把控不当,细胞长的太满才进行传代操作。

操作建议:消化前加入适量缓冲液对细胞进行清洗,清除死亡的细胞团和部分堆叠杂质;确定细胞正确的离心条件,严格按条件执行;根据不同细胞的生长周期,在细胞汇合度达到80%~90%就可以进行传代。

细胞接种:细胞转移至培养瓶时分布不均匀,或者细胞接种密度过高。

操作建议:细胞转移至培养瓶后要进行摇匀操作,放置的时候注意平衡。接种细胞前计数,按照合适的密度进行接种。

细胞状态不好:如果细胞本身的状态不好,或者已经发生老化,也容易造成细胞抱团生长。

操作建议:注意观察细胞状态,及时换液或者传代。

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