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细胞工厂培养过程中细胞空泡化及解决办法
发表日期:2022-10-17

细胞空泡化是指变性细胞的胞质、胞核内出现大小不一的空泡(水泡),细胞呈蜂窝状或网状的现象。变性严重者,小水泡相互融合成大水泡,细胞核悬于中央,或被挤于一侧,细胞形体显著肿大,胞质空白,外形如气球状

细胞空泡化通常伴随着细胞死亡和细胞功能状态的改变,许多自然或者人工合成的化合物以及被细菌或者病毒感染后均会出现不可逆的胞质空泡化,因此出现这种情况,细胞便不可再用于后续的实验中。

细胞工厂出现空泡化的原因及解决办法

细胞老化:原代细胞培养的过程中经常出现这样的情况,这是因为有些细胞传代次数过多,处于终末分化状态,不会再分裂,时间长了就会空泡化而死亡。

正确做法:原代细胞使用较低代次进行实验,传代细胞避免传代次数过高。

pH变化:由于培养液配制错误、储存不当、血清质量不合格等原因,引起的渗透压与pH值发生改变。

正确做法:更换新鲜培养液调整到合适的pH值,再进行培养。

细胞工厂培养过程中细胞空泡化及解决办法_富道细胞

操作不当:胰酶消化时间过长导致细胞状态受损,以及吹打时力气过大产生的大量气泡长期存在于培养液中也会导致细胞的空泡化。

正确做法:选用合适的胰酶浓度,控制好消化时间。操作时避免吹打太过用力,如果出现了大量气泡,可将气泡去除后再培养。

细胞自噬:细胞缺乏营养导致饥饿诱导形成自噬也会形成空泡化,但是这种空泡在光学显微镜下是看不到的,只有在电镜下才能观察到。

正确做法:要保证细胞培养所需的营养充足,可以通过增加血清浓度和在培养基中加入谷氨酰氨解决。

细胞污染:一些细胞出现空泡化,如果继续培养,空泡范围会扩大,即使传代后也如此,出现这种情况,细胞基本无法挽救。后来检测发现,此种细胞存在支/衣原体的感染。

正确做法:严格执行无菌操作,操作时要规范,减少污染的可能性。

这就是在细胞工厂培养过程中细胞空泡化及解决办法。

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