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细胞培养瓶培养细胞时的污染情况
发表日期:2022-08-08

我们在使用细胞培养瓶进行细胞培养时最怕出现的情况可能就是细胞培养瓶的发现了污染了,今天富道细胞来跟大家分析一下细胞培养瓶培养细胞时的污染情况。

细胞房要保证干燥整洁,不然很容易染菌。真菌污染后,培养液清亮,培养瓶中出现丝状物,细胞生长变慢,最后由于营养耗尽及毒性作用而使细胞脱落死亡。一旦发现真菌污染,可能导致整个培养箱中的细胞受到污染。需要彻底清理打扫培养箱、超净台、水浴锅、细胞房等。

细胞培养瓶培养细胞时的污染情况_富道细胞

污染培养细胞的多为烟曲霉、黑曲霉、毛霉菌、孢子霉、白念珠菌、酵母菌等。霉菌污染后多数在培养液中形成白色或浅黄色漂浮物。一般肉眼可见,较易被发现,短期内培养液多不混浊,倒置显微镜下可见于细胞之间纵横交错穿行的丝状、管状、及树枝状菌丝,并悬浮飘荡在培养液中。很多菌丝在高倍镜可见到有链状排列的菌珠;念珠菌或酵母菌形态呈卵形,散在细胞周边和细胞之间生长。

真菌污染多发生在传代、换液、加样等开放性操作中,所以实验过程一定要注意。发生污染后,最好是废弃。虽然抗菌的补救措施,但发生真菌污染后会对实验结果产生影响,因为细胞培养瓶中出现污染一般是废弃这瓶细胞。如果细胞价值较大,大家可以参照一些补救措施进行补救。

发生细菌污染时,培养液短时间内颜色变黄,出现浑浊现象,显微镜下观察时,培养液中有大量圆球状颗粒漂浮,细胞变圆脱落死亡。细菌不像真菌有孢子,所以当一瓶细胞出现污染时,一般不会污染培养箱中其他细胞,将污染细胞废弃就行。有时需要检测菌源在哪里,即把培养液、水浴锅等液体培养验证,如果没有必要进行验证,将这些废弃即可。

细胞房中水浴锅是菌的一大孵育箱,勤换水、灭菌,拿进超净台的物品多喷酒精,杜绝可能染菌的情况。

支原体污染刚开始难以察觉,有专门的检测试剂盒检测。细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和支原体。发生污染后,最好将细胞废弃。其主要的污染原因还是无菌操作技术不当、细胞房超净台环境不佳、血清污染和细胞污染等。严格无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染的最好方法。

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