我们在使用细胞培养瓶进行培养细胞时总会遇到一些特殊情况而养不好细胞,今天富道细胞就来跟大家分享一下细胞培养瓶中细胞生长缓慢应该怎么办。
接种量太少。细胞长得太满会有接触抑制,而细胞接种浓度低,也会使细胞生长繁殖较慢。一般情况下,细胞长至80-90%可进行传代,当细胞长得不太满时进行了传代,会使得细胞接种浓度太低,可能导致细胞自分泌的物质浓度减少,造成生细胞生长缓慢。
因此适宜的接种密度,可以促使细胞增殖,接种密度太低或太高都不利于细胞的生长增殖。
培养液中细胞生长所需的必须成分耗尽。培养液中营养物质耗尽,细胞就会生长缓慢,所以需要定时更换培养液,以保证细胞生长。
如果复苏出来的细胞量不是很多,我会在第二天进行换液。一些细胞生长缓慢,生长周期长,也需要定时更换培养液。
培养液中一般都添加了酚红,在培养基中被用来作为PH值指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。开始时,培养基为粉红色,在细胞生长过程中会产生乳酸和二氧化碳,导致培养液颜色变黄,不利于细胞生长。当观察到培养液变黄,基本可以进行换液培养。
培养试剂保存不当。
血清需保存在-20℃环境中,在4℃保存不超过一个月。培养液放于4℃环境中,尽快用完。培养液失效或质量不好,会影响细胞的生长。当然,这种情况比较少,培养液一般现配现用。如果发现是培养液质量不好,那就换一个牌子的培养液吧。
细胞老化。
当细胞传了很多代后,细胞出现形态活性不好的现象,可能是细胞老化。癌细胞可能影响不大(我们实验室的癌细胞一般传至15代活性会降低),正常人体细胞的传代次数有限有的细胞只用到第三代就不用了,所以这个情况因细胞而异吧。
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