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细胞工厂培养细胞时胰酶配制
发表日期:2022-08-03

我们在使用细胞工厂时对生长到一定程度的细胞就到了收获的时候了,这时候就需要借助胰酶对细胞工厂上的细胞进行消化后再收获一般使用trypsin-EDTA 浓度为 0.25% trypsin-0.53 mM EDTA.2Na 或0.05%trypsin-0.02 mM EDTA.2Na。

首先我们先介绍一下胰酶:胰酶储存的环境一般在–20°C左右,我们在解冻胰酶的普遍是在 4°C 的环境中进行,我们在第一次开瓶后应立即将胰酶少量分装于无菌试管中,并保存于 –20°C环境中,这种操作是将反复冷冻解冻造成 trypsin 之活性降低的影响减少,而且这样的操作流程也会降低污染的可能。

细胞工厂培养细胞时胰酶配制_富道细胞

而我们在细胞工厂培养细胞时胰酶配制也是很重要的一件事浓度过高时,是很容易造成我们细胞培养基中细胞碎片增多、一些黑渣子的增多,所以我们在常规细胞传代时建议用 0.05% 的胰酶进行消化,对于难消化的细胞可采用 0.25% 胰酶进行消化,而细胞工厂的细胞密度过高超过 80% 时,我们可以采用分步消化法。而溶度过低时消化不足则细胞难以从瓶壁上吹下,反复吹打则会损伤细胞活性。因此,控制胰酶消化时间尤为重要。

当然我们在使用细胞工厂或其他细胞培养耗材时不同细胞对胰酶消化液的敏感性不同,细胞对胰酶消化的时间也会有差异。对于新购买的细胞,富道细胞建议我们先用低浓度的胰酶仔细去摸索一下消化时间,可每隔 1 分钟镜下观察细胞是否变圆,记录最佳消化时间,下一次操作时参考之前的记录来控制时间即可。
 这就是富道细胞对细胞工厂培养细胞时胰酶配制时的一些说明,希望可以对各位细胞培养的时候能起到一定的帮助。

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