我们在使用细胞培养瓶培养细胞时出现的问题，无非是细胞出现污染和细胞本身出现了问题，我们在之前的文章中讲述了细胞培养过程出现污染的情况，今天富道细胞来跟大家介绍一下细胞本身的两个问题和解决办法。

细胞培养过程中，发现贴壁细胞表面沾了很多死细胞，传代过程中一直存在这种情况呢，富道细胞有一招百试百灵，那就是用 PBS 洗两遍之后，加胰酶进去，晃一晃，迅速将胰酶倒出，再用 PBS 洗一下，再加胰酶正常消化。死细胞由于粘附能力很弱，第一次加胰酶进去以后会掉下来，第二次加胰酶下来的细胞才是活性比较强的细胞。整完一次之后，再次传代方法同上，一般 2～3 次之后，细胞就完好如初了。

那在细胞培养瓶中进行培养时发现细胞胞质疏松，状态不好，根本就养不起来，我们可以从血清下手就行，要么换好血清，要么提高血清浓度，血清浓度提高到 15%～20% 培养 48 h，换成正常 10% 的浓度，用高浓度的血清培养时间过长对细胞有毒性。

我们在对血清下手之后可以同时采取提高细胞密度的方法，可以从我们的细胞培养瓶换到6孔板，12 孔板等，细胞密度大，细胞分泌的细胞因子多，肿瘤细胞通过旁分泌途径促进细胞生长。

针对细胞胞质疏松富道细胞来跟大家分享一下预防方法：老化的原因在于细胞传代次数比较多，胰酶消化时间太长，这时候，一定要控制细胞传代次数，注意胰酶消化时间，胰酶消化时间过长，容易导致细胞状态不佳以及胞质疏松。