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细胞培养瓶培养细胞时出现的问题
发表日期:2022-08-03

我们在使用细胞培养瓶培养细胞时出现的问题,无非是细胞出现污染和细胞本身出现了问题,我们在之前的文章中讲述了细胞培养过程出现污染的情况,今天富道细胞来跟大家介绍一下细胞本身的两个问题和解决办法。

细胞培养过程中,发现贴壁细胞表面沾了很多死细胞,传代过程中一直存在这种情况呢,富道细胞有一招百试百灵,那就是用 PBS 洗两遍之后,加胰酶进去,晃一晃,迅速将胰酶倒出,再用 PBS 洗一下,再加胰酶正常消化。死细胞由于粘附能力很弱,第一次加胰酶进去以后会掉下来,第二次加胰酶下来的细胞才是活性比较强的细胞。整完一次之后,再次传代方法同上,一般 2~3 次之后,细胞就完好如初了。

细胞培养瓶培养细胞时出现的问题_富道细胞

那在细胞培养瓶中进行培养时发现细胞胞质疏松,状态不好,根本就养不起来,我们可以从血清下手就行,要么换好血清,要么提高血清浓度,血清浓度提高到 15%~20% 培养 48 h,换成正常 10% 的浓度,用高浓度的血清培养时间过长对细胞有毒性。

我们在对血清下手之后可以同时采取提高细胞密度的方法,可以从我们的细胞培养瓶换到6孔板,12 孔板等,细胞密度大,细胞分泌的细胞因子多,肿瘤细胞通过旁分泌途径促进细胞生长。

针对细胞胞质疏松富道细胞来跟大家分享一下预防方法:老化的原因在于细胞传代次数比较多,胰酶消化时间太长,这时候,一定要控制细胞传代次数,注意胰酶消化时间,胰酶消化时间过长,容易导致细胞状态不佳以及胞质疏松。

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