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细胞工厂培养细胞时不贴壁的六种解决方案
发表日期:2022-08-03

我们是使用细胞工厂这种大规模细胞培养耗材时是进行的贴壁细胞培养,那么如果出现贴壁细胞不贴壁了我们该怎么做呢?今天富道细胞来跟大家分享一下细胞工厂培养细胞时不贴壁的六种解决方案:

1、细胞的传代最重要的是胰酶处理时间:消化不够细胞本身就是成团的;若胰酶处理太久,容易造成细胞膜蛋白损伤,使细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。

解决办法:缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度。

2、缺少贴壁因子:血清中含有促贴壁因子,而无血清培养基工艺中由于缺少这种促贴壁因子,细胞的贴壁效果会下降很多。

解决办法:更换血清。

3、支原体或细菌的污染。

解决办法:分离细胞工厂中培养物,检测支原体。清洁支架或培养箱。如发现支原体污染,丢弃培养物。

细胞工厂培养细胞时不贴壁的六种解决方案_富道细胞

4、培养液配置、储存不当,如 pH 值过碱,Gln 量太少等原因。

解决办法:使用无菌醋酸溶液调整 pH 值或充入无菌 CO2。

5、复苏的细胞本身状态不好,已经老化,失去贴附性。

解决办法:启用新的保种细胞。

6、如果细胞比较珍贵或没有备份细胞

解决办法:可尝试将不贴壁细胞收集离心,再用 PBS 将沉淀清洗一遍,离心后的沉淀加入胰酶重新消化接种,同时提高血清浓度到 15%~20%。
  以上就是富道细胞为大家分享的细胞工厂培养细胞时不贴壁的六种解决方案。希望能对各位有所帮助

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