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如何消化细胞培养瓶内的细胞
发表日期:2022-04-27


细胞生长到一定程度后,需要利用消化酶将其消化下来,进行下一步的培养。虽然消化细胞是一项常规操作,但不注意也会影响细胞后期的生长。那么,我们该如何消化细胞培养摇瓶内的细胞呢?


首先,消化细胞培养瓶内的细胞需要借助消化酶,常用的包括胰蛋白酶和胶原酶,具体选用哪种要根据细胞的种类及试验情况而定,消化细胞具体操作流程如下:


1、吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。


2、加入少量胰酶细胞消化液,略盖过细胞即可,根据胰酶效率差异可以增加惑减少胰酶用量。室温放置30秒至2分钟(不同的细胞消化时间有所不同)


如何消化细胞培养摇瓶内的细胞


3、显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化呈白茫状;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。


4、此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。


消化细胞培养瓶内的细胞时要控制好时间,如果消化过度容易造成大量细胞从瓶壁上脱下,甚至造成细胞破碎。

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