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如何更换细胞培养瓶内的溶液 遵循这四步
发表日期:2022-01-11

在培养细胞的过程中,换液是一项非常常规操作,它主要是为了清除细胞在生长过程中产生的各种代谢废物,补充新鲜的培养基,促进细胞生长。那么,如何更换细胞培养瓶内的溶液呢?

T75细胞培养瓶

T75细胞培养瓶

准备工作:装有75%医用消毒酒精的酒精喷壶、PBS缓冲液、含血清培养基、巴氏吸管、移液器、废液缸。

具体步骤:

1、将器材放入超净台,打开紫外照射灭菌,若是培养的细胞对温度比较敏感,可以将含血清的培养基瓶放入37℃的水浴箱使得培养基温度在37℃,再转移到超净台紫外灭菌。另外,细胞培养间也需要紫外照射半小时左右。

血清培养基瓶

血清培养基瓶

2、从培养箱取出细胞培养瓶,用酒精喷壶在瓶子表面喷洒75%酒精消毒,转移到超净台,打开盖子,轻轻吸出旧的培养液,可用移液器加入新鲜含血清培养基,注意一定不要从细胞贴壁面加入培养基,应从侧壁加,动作轻柔,以免冲落细胞。

3、加好培养基后,盖上盖子,在瓶子上做标记,注明换液时间,细胞种类,操作人员等信息。

T25细胞培养瓶

T25细胞培养瓶

4、放入培养箱之前应再次用酒精喷一喷瓶子表面,然后应记得整理操作台,用酒精擦拭超净台台面,清理废液和垃圾。

在进行换液操作时,全程注意无菌,操作人员要穿好灭菌服,戴好灭菌手套和口罩,手接触到细胞培养瓶瓶口时一定要小心,避免造成污染。

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