血清是细胞生长的必备营养物质,我们经常会发现血清培养基瓶内的血清出现肉眼可见的沉淀,这些沉淀主要是纤维蛋白、磷酸钙等物质。那么如何避免这些沉淀的出现呢?
血清瓶内的血清出现沉淀,其原因是多方面的,但这些沉淀一般不会影响血清的品质,但出现后需要花费时间进行处理,费时费力。如果操作的时候多加注意,可以在很大程度上避免沉淀的出现:
首先,应按照逐步解冻的方式正确解冻血清:从-20℃取出后,置于 4℃冰箱缓慢解冻,最后置于室温完成解冻。如果直接从-20℃拿到室温或 37 ℃水浴解冻,则非常容易产生沉淀。在解冻过程中,请注意时不时缓慢摇晃血清培养基瓶,减少沉淀的产生。为避免反复冻融,建议将血清分装使用。
其次是血清的使用和保存,血清沉淀很难预测和避免,出现沉淀后也无需担忧,这并不会影响血清的品质。已知血清沉淀在以下条件下会有增多的可能:1) 热灭活;2) 37℃培养;3) 反复冻融;4) 伽马射线照射; 5) 2-8℃长期保存; 6) 长期保存于可自动化霜的冰箱中(温度不稳定)。
5层细胞工厂
在血清的解冻方式、使用和保存中注意操作方式,可以很大程度上避免血清瓶内的血清出现沉淀。如果出现沉淀后,可采用2000 rpm离心5分钟,取上清使用就好,比过滤方便,不需要另外准备滤心和针筒,又不容易污染。