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细胞培养瓶在细胞复苏过程中的应用
发表日期:2021-10-07

细胞复苏是指将冻存在或者-70℃冰箱中的细胞解冻之后重新培养,细胞恢复生长的过程。在这项操作中,细胞培养瓶是必不可少的一种耗材,它主要是为细胞提供良好的生长表面与环境,以促使细胞达到良好的生长状态。细胞复苏的过程如下:

细胞复苏
细胞复苏

1、将冷冻管从液氮中取出,迅速投入37℃水浴融化,融化后要尽快(约1min)移出37℃水浴。37℃水浴时间延长会提高细胞死亡率,复苏过程中一般细胞死亡率在20%~25%之间。

2、迅速用擦拭冷冻管外部杀菌消毒,然后放置在冰浴上。

3、小心开启瓶盖,把细胞转入含有4mL培养基的细胞培养瓶中,然后把培养瓶移至培养箱,36℃~38℃培养1h,让细胞贴壁。

细胞培养瓶
细胞培养瓶

4、细胞贴壁后,小心移弃培养基,主要是去掉DMSO(悬浮生长细胞要通过离心沉淀除去DMSO)、死细胞及其碎片,加5mL新鲜培养基,36℃~38℃培养。

5、24h后,更换新鲜培养基,继续培养直到形成单层,便可以传代。

6、详细记录复苏细胞的名称、数量、复苏时间、存放部位等。

血清培养基瓶
血清培养基瓶

以上是利用细胞培养瓶进行细胞复苏的具体步骤,需要注意的是,细胞冻存液的融化速度要快,尽量在1-2min内完成,否则容易造成细胞损伤。

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