细胞经常会有需要冻存和复苏的,富道细胞之前跟大家介绍了冻存管冻存细胞的操作流程,今天跟大家分享一下复苏冻存管内细胞的方法,首先我们要知道细胞复苏时速度要快,使之迅速通过细胞最易受损的-5~0℃,细胞仍能生长,活力受损不大。
1、准备一个1000ml的烧坏,内装2/3杯37℃的温水。
2、从液氮中取出冻存管、迅速置于温水中并不断搅动。使冻存管中的冻存物在1分钟之内融化。
3、打开冻存管,将细胞悬液吸到离心管中。
4、1000rpm离心10分钟,弃去上清液。
5、沉淀加10ml培养液,吹打均匀,再离心10分钟,弃上清液。(细胞数量少的情况下,复苏时可省略步骤5。)
6、加适当培养基后将细胞转移至细胞培养瓶中,37℃培养,第二天观察生长情况。
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