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冻存管冻存原代细胞技术
发表日期:2023-01-05

我们在细胞培养过程中,为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或原代细胞株,要将细胞冻存。今天就跟大家分享一下冻存管冻存原代细胞技术。

首先我们要知道我们在细胞冻存的时候,是有一些先决条件的,比如我们在观察原代细胞时要选用生长数量好且多的细胞,而且在使用冻存管进行冻存之前还需在前一天换液。而且我们在使用冻存管进行冻存贴壁细胞的时候需要用胰酶将细胞消化下来,后续将悬液置于离心管之中进行离心之后,在将清液弃用,后续沉淀的时候可以加培养液(一般为二甲亚砜或甘油的培养基)。

冻存管冻存原代细胞技术_富道细胞

后续需要进行悬液分管,在分管的时候切记封口一定要严,且不能超过冻存管的容量,否则会在复苏和冻存的时候会发现管壁爆裂。在密封好冻存管之后需要进行详细记录,如使用sbs冻存管也需要及时进行录入详细信息,或者用记号笔标明细胞种类和冻存日期。

需要注意的是使用冻存管冻存的温度一般用液氮的温度-196℃,但是是以一定的冷却速度冻存,最终保存于液氮中,可以按照以下顺序进行降温:室温→4℃(20分钟〕→冰箱冷冻室(30分钟)→超低温冰箱(-80℃过夜)→液氮,在这种极低的温度下,细胞保存的时间几乎是无限的。这就是给大家分享的冻存管冻存原代细胞技术了,希望对大家有所帮助。

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