我们在使用细胞工厂进行培养细胞时,总会有一道工序是必不可少的,那就是我们的细胞消化,而细胞消化的操作也是重中之重的,因为如果我们操作不当,会导致细胞工厂内细胞状态发生改变,会导致培养细胞时发生不必要的误差。富道细胞就来跟大家分享一下细胞工厂培养细胞时消化的方法。
我们在使用细胞工厂时使用最多的方法:酶消化法,我们在使用酶消化时,浓度基本都是控制在0.25-0.5%。作用时间根据细胞工厂内培养细胞的种类、作用温度等因素而变化,时间从几分钟到几十分钟不等。大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37恒温的温度下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含钙、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。
除此方法还有一种比较罕见的酶消化法:胶原酶,此方法主要是用与原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温和,对细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。我们在使用细胞工厂培养细胞时进行酶消化时原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是先采用PBS润洗细胞吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化细胞。
这就是富道细胞分享的细胞工厂培养细胞时消化的方法了。希望能对大家有一定的帮助,富道细胞致力于生物耗材领域深耕多年,细胞耗材培养效果不逊于国际一线品牌。
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