富道细胞在之前已经简单描述过了细胞工厂内如果出现支原体污染的特征和表现方式,因为如果细胞工内细胞被支原体污染,细胞工厂内培养基一般情况下不会出现浑浊状态,那我们可以通过这四种检测方式:
1.利用相差显微境检测支原体污染
将细胞工厂内怀疑被支原体污染的细胞按种放在盖玻片上,静置一天后取出在使用相差油镜进行辅助观察细胞状态,之前简单介绍过了支原体的呈现形状,如果细胞工厂内细胞被支原体污染,那么进行观察后就会发现在细胞表面和细胞与细胞直接有一些暗色微小的颗粒在做不规则的运动。
2.荧光染色法
DNA荧光染色法是利用荧光染色剂双苯咪唑Hoechst33258能够结合支原体DNA中的A-T碱基富集区域的原理,被支原体污染的细胞经染色后,其细胞核外与细胞周围可看到许多大小均一的荧光点,即是富含A-T碱基区域的支原体DNA。
3.电镜检查
用扫描电镜方法简便快速一般细胞工厂中的细胞培养48~72小时,细胞接近汇合前,用胰酶消化细胞制成细胞悬液后进行固定、包埋、切片后才能进行观察,也可以利用透射电镜。
4.DNA分子条文检查或支原体培养等方法
检出率高,但方法较为复杂。
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