我们在培养细胞时最怕出现的情况之一就是细胞培养中出现污染的情况,今天富道细胞来跟大家简单分享一下细胞工厂污染的几种表现及补救方法。
1. 细菌污染:细胞工厂中如果出现细菌污染的话,具体情况表现为:细胞工厂在倒置显微镜下培养基内有黑色细沙状,且因为细胞工厂内细胞感染细菌的不同,会出现有不同的外形并导致细胞工厂里面的细胞培养基液体出现浑浊变黄的迹象,会明显对细胞工厂内细胞生长影响。
如果出现细菌污染情况我们需要对培养细胞所需器皿的灭菌情况进行仔细检查,在高压灭菌时放气时间、压力是否足足够,特别是用于储存培养液接触的移液管等细胞培养耗材,如果出现连续两次污染的话有可能造成储存液污染。可以在下次使用培养液前检查是否内部存在浑浊的现象,并根据此现象添加相应的抗生素处理。
2. 霉菌污染:细胞工厂内如果出现霉菌污染的话具体表现为:内部培养基是清亮的且在倒置显微镜观察下是没有明显杂质,在37度恒温培养箱内培养2-3天,基液依旧清亮,但是内部会有絮状杂质呈现,且镜下观察内部可发现有细丝状的团状漂浮物,有明显的菌丝现象,虽然细胞工厂内细胞仍可生长,但时间长之后细胞会出现状态变差。
那我们可以采用硫酸铜溶液来擦拭CO2培养箱内,后在水盘里也需要加上适度饱和量的硫酸铜。也可以在培养箱中托盘加入饱和的消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。
3. 支原体污染:支原体污染的症状为黑色且形状为多形,细胞工厂内培养基会有浑浊现象,由于血清检测项目中很少包涵支原体阴性检测,且支原体是牛血清中最常见的微生物之一并不能采用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是慢慢死去。
而出现这种现象可以可以采用兽用支原体病的药,但可用于细胞培养,无任何不良反应。使用时用50ug/ml Tylosin培养液培养6天或连续传两代即可清除支原体污染。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度。
这就是细胞工厂污染的几种表现及补救方法,富道细胞也希望可以帮到大家。
上一篇: 血清瓶在无血清培养基的应用
下一篇: 细胞工厂培养细胞时的“黑胶虫”污染