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如何消化好细胞培养瓶内的细胞
发表日期:2022-11-01

细胞培养瓶多用来培养贴壁细胞,这类细胞贴附在瓶子底部生长,当细胞生长达到一定程度后,需要将细胞消化下来再进行后续操作。那我们该如何消化细胞培养瓶内的细胞呢?

由于贴壁细胞的生长特性,为了维持细胞良好的状态,我们需要借助特殊的溶液进行细胞消化,也就是胰酶。多数细胞消化的时候只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。

如何消化好细胞培养瓶内的细胞_富道细胞

对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37℃消化。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。

需要注意,不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般我们肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与细胞培养瓶材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了,这个时候应该停止消化。

细胞消化的效果直接影响后续的细胞培养实验,在消化细胞的时候我们要注意无菌操作,避免将外源污染引入细胞培养瓶,影响后续细胞生长。

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