细胞工厂是大规模贴壁细胞培养经常会用到的一种耗材,主要用于制药、疫苗生产、细胞治疗等领域。那在培养过程中我们我们要实时掌握细胞的生长状态,根据具体情况做出相关调整。可以通过MTT法对细胞的活性进行检测,从而确定细胞生长情况。今天富道细胞来跟大家介绍一下细胞工厂中MTT法测细胞相对数和相对活力。
活细胞中的琥珀酸脱氢酶可使MTT分解产生兰色结晶状甲赞颗粒积于细胞内和细胞周围。其量与细胞数呈正比,也与细胞活力呈正比。
1、细胞悬液以1000rpm离心10分钟,弃上清液。
2、沉淀加入0.5-1ml MTT,吹打成悬液。
3、37℃下保温2小时。
4、加入4—5 ml酸化异丙醇(定容)。打匀。
5、1000 rpm离心,取上清液酶标仪或分光光度计570nm比色,酸化异丙醇调零点。
注意:MTT法只能测定细胞相对数和相对活力,不能测定细胞绝对数。
那这是富道细胞为大家分享的如何在细胞工厂中MTT法测细胞相对数和相对活力的办法了
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