今天富道细胞来跟大家说一下细胞工厂在Vero细胞上面的应用,首先呢先简单介绍一下我们的主角Vero细胞这种细胞是源自于非洲绿猴肾脏上皮细胞。Vero 细胞是世界卫生组织和我国生物制品规程认可的疫苗生产细胞系。随着对疫苗质量和安全性要求的不断提高,使用无血清工艺取代血清工艺培养 Vero 细胞生产病毒疫苗已成为发展趋势。
那细胞工厂在培养Vero细胞时我们的操作方法可以按照细胞复苏后从方瓶扩增至细胞工厂,一个5层细胞工厂约接种300x106cells(按9.5x104cells/c㎡),加培养液200-300ml/层,培养3天,待细胞长成致密单层后进行传代。
我们进行细胞工厂代传时要缓慢弃去细胞工厂中的培养液,可不加PBS润洗。直接加入约25ml/层胰酶(Gibco TrypLE™ Express Enzyme(1X))溶液。充分浸润细胞1-2min后,弃去胰酶,将细胞工厂置于37℃温箱5-6min。
镜检90%以上细胞均变圆变亮后拍打细胞工厂,使细胞分散。再加入新鲜培养液重悬细胞,并晃动细胞工厂,使细胞分散均匀。将重悬的细胞倒入无菌容器混匀后取样计数,进行下一步扩增、培养。
这就是细胞工厂在Vero细胞的应用了,而富道细胞工厂与国内外头部品牌产品增殖数据对比,在细胞克隆形成率、贴壁速度和细胞增殖速度上优于国内同类产品,与进口同类品牌相当,如果有需要欢迎来咨询。
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