我们在CHO悬浮细胞的发酵生产，需要做细胞株的传代稳定性，那么我们在细胞一般都会出现几个疑问，今天富道细胞来跟大家大概解答一下细胞摇瓶在CHO悬浮细胞的发酵生产的应用。

1. 传代稳定性实验一般要传多少代合适呢？

要根据以后的生产周期来决定的。譬如从复苏细胞开始到完成一批生产的时间是多少，稳定性至少要大于这个时间吧。为了生产项目的可靠性建议做生产周期的两倍稳定性时间，这样可以看出细胞株表达量的一个变化趋势。细胞株会随着传代的时间变化呈一个下降趋势的。

2. 检测目的蛋白的表达稳定性，每一代细胞应培养多长时间取样呢？是不是每代细胞都要补料培养半个月再测？

每一代都做没有这个必要，做几条能够看到表达量稳定的趋势就行了（但也不能做两三条这样没法看到趋势的）。

3. 检测细胞遗传稳定性，需要提DNA那每一代细胞培养多长时间取样呢？

这个可以和第二点补料培养同周期做。

4. 有木有详细点的传代稳定性实验的protocl可以参考啊？

稳定性主要关注细胞株表达量是否稳定，蛋白活性是否是稳定的及细胞遗传稳定。这些都是为了说明你以后生产时稳定的。

5.如果用摇瓶做的话，那细胞都不用建库了，直接接种到摇瓶里开始fedbatch培养了？

即使用摇瓶也是要建库的，稳定性评估的是MCB和WCB库，不是单纯的评估细胞株的。