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细胞工厂收获细胞流程及注意事项
发表日期:2021-06-03

随着生物制药、疫苗、单克隆抗体等行业的快速发展,细胞工厂在大规模细胞培养中的重要性愈加凸显。细胞培养是一项严谨的工作,从细胞生长环境、培养基的加入、收获细胞等方面都有严格把控。

细胞工厂

细胞工厂

在利用细胞工厂收获细胞时要严格按照以下流程操作:

1、培养结束后将培养液倒出,使用无钙无镁磷酸盐缓冲液(CMF-PBS)清洗(40-50 ml/层),若有需要重复清洗一次。

2、消化:消化液(10-40 ml/层)提前预热。

3、收集:1000 rpm 离心5分钟,去除消化液,收集细胞。

4、清洗:用CMF-PBS或培养基清洗消化过的培养器。

在收获细胞时还要注意以下几点:

1、确保CMF-PBS完全浸过每层培养面,并轻轻前后晃动细胞工厂,将残留的培养液清洗干净。

2、消化液平均分布到每层,轻轻前后左右倾斜培养器,确保消化液完全浸过培养面,轻轻拍击培养器帮助细胞从表面脱离。

3、对于细胞工厂,由于不能清晰观察中间层的细胞消化状态,建议参照完全相同培养条件下的培养瓶或单层细胞工厂的消化状态。亦可使用专用的多层细胞培养器观察台来观察每层细胞的生长状态。

细胞工厂配件

3、若清洗液或者是细胞工厂培养层存在大量细胞,则需要清洗多次或调整细胞消化的操作。

4、培养温度的一点点偏差都可能影响到细胞的收获率,需密切关注培养的温度是所设定的温度。

以上是细胞工厂收获细胞的流程及注意事项,细胞对于环境非常敏感,做好细胞收获工作是细胞培养成功与否的关键,需在各个环节都严格把控。

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