作为一种多层结构的细胞培养容器,细胞工厂收获细胞时相较于普通的容器要复杂,而收获细胞又是关系到试验效果的重要环节。注意以下这五点,收获细胞稳稳的。
1、弃去培养液后使用无钙无镁磷酸盐缓冲液(CMF-PBS)清洗细胞工厂(40~50 mL/层),若有需要重复清洗一次,确保将残留的培养液清洗干净。
2、加入消化液平均分布到每层(10~40 mL/层),轻轻前后左右倾斜培养器,确保消化液完全浸过培养面,细胞出现间隙时,弃去消化液,轻轻拍击容器帮助细胞从生长面脱离。
3、由于是多层结构,不能清晰观察中间层的细胞消化状态,建议参照完全相同培养条件下的培养瓶 或单层容器的消化状态。或使用专用的多层细胞培养器观察台来观察每层细胞的生长状态。
4、若细胞悬液收集完成后,培养层仍存在大量细胞,则需要清洗多次或调整细胞消化的操作。
5、培养温度及CO2浓度的偏差可能影响到细胞的收获率,需密切关注培养过程中的温度和CO2浓度设定值是否满足需求。
虽然收获细胞时过程略显繁琐,但细胞工厂培养面积大,占用空间小,还可以通过配套管路实现密闭培养,降低细胞污染风险。这些优势也让其成为生物制药、疫苗、细胞与基因治疗产品研发与生产中不可或缺的工具。
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