在培养细胞的时候我们经常会遇到这样或那样的问题,如细胞不贴壁、细胞污染甚至死亡等,其中,细胞培养瓶中出现沉淀也是常见的一类问题。如果出现沉淀,有可能是浓度变化或钙盐引起。
浓度:在培养细胞的时候,培养基是必备的营养物质,如果培养基蒸发,其中的组分(包括盐)的浓度将会增加,特别是培养基表面可能容易形成晶体沉淀。避免浓度变化,我们首先要确保细胞培养瓶不经历蒸发,时刻检测孵育箱的驾驶效果,避免脱水。
钙盐:制备无血清培养基时,组分添加的顺序可能导致不可溶分子的形成。钙盐尤其容易沉淀,比如CaCl2和MgSO4在溶液中反应产生CaSO4晶体。高压灭菌和pH值不稳定会加剧这一问题。避免这种情况的发生,我们可以在逐个添加其它培养基组分之前,用去水离子水单独溶解CaCl2;或者可以添加缓冲液避免渗透压的变化。
当然,浓度变化或者钙盐只是细胞培养瓶中出现沉淀的两方面原因,也有可能是其他原因导致,如温度发生极端变化或者金属补充物等。了解引起沉淀的原因后,我们就可以从操作上降低沉淀的出现,确保实验进程。
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