如果说有一件事的费心程度堪比养娃,那一定是培养细胞。细胞不贴壁、细胞污染、细胞死亡……过程中需要面临各种突发状况,其中细胞培养瓶中出现沉淀也是常见的一种情况,原因可能与金属补充物有关。
铜、铁和锌等金属离子是细胞生长所必需的,是无血清培养基的重要补充物。培养系统中其他血清组分的缺失可能导致这些金属沉淀,为细胞形成有毒的环境。在较高pH环境下(一般>8时),碳酸盐和氢氧根离子与铜离子、磷酸盐和氢氧根离子与铁离子、碳酸盐、磷酸盐和氢氧根离子与锌离子、氢氧根离子与镁离子易形成不溶性沉淀物;在氧化条件下,铜和锌更易于沉淀,也就是我们在细胞培养瓶中看到的沉淀。
那么我们如何避免因为金属补充物产生的沉淀呢,可以通过加入铁结合蛋白转帖蛋白,也可添加缓冲液避免渗透压的变化,还可以向培养基中补充甘露醇或丙酮酸以结合过氧化氢,尽可能降低氧化应激。
总之,细胞培养瓶中出现沉淀不要慌,具体分析找出原因,制定相应的措施就可以大大降低沉淀的出现,确保细胞的良好生长。
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