在悬浮细胞培养中,细胞摇瓶是常用的一种细胞培养耗材。悬浮细胞的生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长。在实际培养中,我们如何确定加液量的多少呢?
细胞摇瓶常见的规格包括125ml、250ml、500ml、1000ml,满足不同规模的细胞培养需求,如125ml与250ml小容量的瓶子主要应用于小规模的试验,而500ml和1000ml规格则用于中的规模的细胞培养试验。这种耗材使用时要借助摇床的震动来降低细胞的抱团率,维持细胞良好的生长状态。细胞培养需要在无菌的环境中进行,因此,三角培养瓶在投入使用前都会经过特殊的灭菌处理,达到无DNA酶、无RNA酶、无动物源成分的效果,给细胞生长提供良好的环境。
根据瓶子规格的不同,四个规格的瓶子的建议加液量由低到高分别为30ml、60ml、125ml、500ml。一般培养细胞时的溶液体积控制在摇瓶总体积的20%-30%左右,在瓶身上带有清晰的刻度线,方便可视化观察溶液的容量。
以上是不同规格的细胞摇瓶的建议加液量,这个容量也不是固定不变的,要根据细胞生长特性、接种密度等综合考虑,避免因为加液量过高振荡不到位,影响细胞生长。
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