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细胞工厂培养细胞时的六种污染
发表日期:2022-08-08

我们在使用细胞工厂等细胞培养耗材进行细胞培养时,如果出现细胞污染的情况下,我们这段时间的努力可能都会白费。那我们如何分辨这些污染的情况呢?今天富道细胞就跟大家分享一下。

细菌污染:肉眼可见细胞工厂底部有一层白色的薄膜,培养基浑浊变酸变黄呈云雾状,镜下观察有自由行动的颗粒,细胞状态差、基本死亡、看不到正常细胞形态。在高倍镜下看到的有可能是一些细胞状态不好分泌的杂质,也有些是细胞凋亡后的碎片。通常凋亡细胞的裂解产物对正常细胞生长是不利的(比如溶酶体的释放),所以有的话建议通过换液的方式去掉。这些小黑点会有布朗运动,看上去跟细菌一样会动,区别在于细菌的形态是每个点都几乎一样,而且能看到某些黑点会向某一方向移动较长的距离(杆菌的话在高倍镜下常有2根短杆状的菌体黏在在相互扭动,有臭味),而碎片一般是在原地来回反复地振荡,而且数量也不会增多。培养基是否浑浊和细菌密度有关,污染初期数量不多是不浑浊的。

细胞工厂培养细胞时的六种污染_富道细胞

霉菌污染:培养液清亮,肉眼看到培养瓶有团块的霉菌斑/菌落,可见絮状漂浮物,显微镜下看到霉菌的菌丝,呈细束纤维状或较为密集的孢子团块,呈细丝竹节管状;污染初期pH稳定,严重后迅速升高。

酵母菌污染:肉眼看到培养瓶颜色变得浑浊,显微镜下看到小的酵母颗粒。(注:真菌通常倾向于聚集生长,在培养体系内形成“毛茸茸”的菌落,或丝状菌体,但一般不出现培养基变酸等现象。)

白色念珠菌:污染肉眼看到培养瓶颜色变得浑浊,显微镜下看到一串一串的白色念珠菌。

支原体污染:细胞会长的慢,量少时培养基不会浑浊,对细胞影响较小,但支原体增殖速度快,逐渐影响细胞生长,细胞边缘不清晰,培养基逐渐浑浊。支原体在没做特殊处理的情况下无法用普通光镜观察到,只能买个支原体检测试剂盒定期检测一下/支原体抑制剂处理、日常预防。

真菌污染:细胞培养基清亮不变色,镜下可见毛毛的白色丝状漂浮物,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢,不像细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了。

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