支原体污染是基础研究和工业生产中一个经常遇到的问题,在利用细胞工厂进行细胞培养或大规模工业化生产时,支原体污染也非常让人头疼。那么,遇到这种情况该怎么办呢?
支原体是一种大小介于细菌和病毒之间 (最小直径 0.2um) 并独立生活的微生物,支原体污染细胞后,培养液可不发生混浊,多数情况下细胞病理变化轻微或不显著,细微变化也可由于传代、换液而缓解,因此易被忽视。但个别严重者,可致细胞增殖缓慢,甚至从细胞工厂脱落。
如果出现支原体污染,对于非重要的细胞,如培养中的细胞、WCB的细胞等,将培养物与用过的培养基灭活后丢弃即可。对于较为重要的细胞,可以采用用MRA处理、药物辅助加温处理、使用支原体特异性血清、动物体内接种除菌法、巨噬细胞吞噬法、使用支原体清除培养基等方式进行处理。
在利用细胞工厂进行细胞培养工作过程中,预防支原体污染是关键。可以通过控制环境污染、严格实验操作、细胞培养基和器材要保证无菌、在细胞培养基中加入适量的抗生素等方式降低支原体污染的概率。
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