在培养细胞时,细胞培养方瓶是用量比较多的一种细胞耗材。培养细胞是一项非常严谨的工作,它需要适宜的条件才能得以更好的生长。生长到一定程度好就涉及的细胞的收获,那么,如何更好的消化瓶子内的细胞呢,可以遵循以下四项步骤:
1、第一步:倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍,这样做的目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。
2、第二步:加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新的细胞培养瓶。
3、第三步:吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸弃胰酶,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。
4、第四步:用新的胰酶加进瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打,悬液传入新瓶培养。
通过以上操作,从细胞培养方瓶内消化下来的细胞质量更好,在进行后期的传代过程中也会有更好的生长状态。
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