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如何区分细胞摇瓶中的活细胞和死细胞
发表日期:2022-05-16


细胞的体外培养技术是指在无菌、适当的温度和一定的条件下,使细胞生存、生长和繁殖的过程,细胞摇瓶是培养悬浮细胞常用的一种耗材。在培养细胞时,了解细胞的生长情况,根据具体情况做出相应调整是试验的必然操作。


一般情况下,我们可以通过显微镜观察细胞的状态,活细胞中间透亮、饱满、有光泽,死细胞则较暗。此外还可以通过台盼蓝染色法来计算细胞摇瓶中的细胞活力。台盼蓝是一种有机化合物,常用作细胞活性染料,用于检测细胞膜的完整性,检测细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。


用品准备:


1. 4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4度保存。使用时。用PBS稀释至0.4%。


2. 吸管、血细胞计数板、显微镜


如何区分细胞摇瓶中的活细胞和死细胞


操作步骤:


1、制备单细胞悬液。并作适当稀释(106 细胞/ml)


2、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。


3、计数:在三分钟内,用计数板分别计数活细胞和死细胞。


4、活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100。


综上所述,区分细胞摇瓶中的活细胞和死细胞可以利用以上两种方法。在利用台盼蓝法染细胞时,时间不宜过长。否则部分活细胞也会着色,干扰计数。


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