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细胞培养瓶摇瓶内培养液PH下降过快的原因分析
发表日期:2022-04-24

细胞生长需要适宜的PH,多数为7.2-7.4,如果偏离此范围对细胞将产生不利影响。有时候我们会遇到细胞培养瓶中细胞摇瓶内的培养液PH下降过快的情况,这是什么原因导致的呢?


通常细胞生长得非常快时,pH值通常下降得会非常快。这时候可以通过及时传代、提高传代比例或降低血清量等方法进行解决。此外,细胞培养瓶的盖子如果拧得太紧、NaHCO3 缓冲系统缓冲能力不够、培养液中盐浓度不正确、细菌、酵母或真菌污染等也能导致pH值通常下降得很快,这时候可以按以下方法操作:


1.按培养液中NaHCO3 浓度增加或减少培养箱内CO2 浓度,2.0g/L 到3.7g/L 浓度NaHCO3对应CO2浓度为5%到10%。


2.改用不依赖CO2培养液。


细胞培养瓶摇瓶内培养液PH下降过快的原因分析


3.松开瓶盖1/4 圈。加HEPES 缓冲液至10 到25mM终浓度。


4.在CO2 培养环境中改用基于Earle′s 盐配制的培养液,在大气培养环境中培养改用Hanks 盐配制的培养液。


5.如果是污染造成的则丢弃培养物,,尽快移到细胞培养区域外,培养物经84等强氧化剂处理后,倒入水池,或用抗生素除菌。


总之,如果细胞摇瓶内的培养液PH值下降过快,其原因可能是多方面的,找出具体原因才便于采用相应的处理方法。

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