在利用细胞摇瓶培养悬浮细胞的过程中,我们经常会出现死细胞和细胞碎片,细胞死亡后由于细胞结构的破坏会释放出损伤分子,影响活细胞的生长状态。那么我们如何去除死细胞呢?目前常用的有以下几种方法:
1.磁珠分选:磁珠分选是一种在磁场下,通过磁珠标记细胞以达到分选目的的技术。它通过磁场将细胞摇瓶内结合了磁珠与未结合磁珠的细胞分离,筛选出死细胞。
2.密度梯度离心:用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度,将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部,通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。此离心法的关键是选择合适的离心转速和时间。
3.流式分选:是比较传统的一种分选方法,在分选一些复杂且稀有的细胞类型、需要基于细胞内标记或基于细胞表面标记物表达水平进行分选时,必须使用流式分选,但这种方式对仪器和操作人员技能的要求较高。