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细胞培养瓶培养昆虫细胞注意这五点
发表日期:2022-02-10

昆虫细胞是主要提取来自昆虫的一类真核细胞。通过培养制造宿主的病毒,可以引起昆虫流行病,但对人畜和植物无害,因而可作病毒杀虫剂,还可以生产某些药用蛋白。细胞培养瓶是培养昆虫细胞常用的一种细胞培养耗材,那么在培养昆虫细胞时需要注意哪些问题呢?

T75细胞培养瓶

T75细胞培养瓶

1、温度与环境:昆虫细胞一般应该在27℃、非湿化的环境中培养,建议不要进行二氧化碳交换,所以细胞培养瓶尽量选择密闭的盖子。

2、培养基:不同细胞对培养基的需求也有所差异,应该根据细胞生长特性,选择昆虫细胞专用的培养基。

T225细胞培养瓶

T225细胞培养瓶

3、贴壁昆虫细胞:细胞密度低于汇合状态的20% 时,细胞生长会受到抑制。健康状态的细胞是对数期收获的细胞,所以在传代时应选择对数期进行。但是,如果培养的是强贴壁性昆虫细胞,则应在细胞达到汇合状态或者刚刚开始从培养瓶底部脱离时进行传代,因为此时细胞容易脱离。

4、贴壁昆虫细胞在无血清培养条件下,昆虫细胞与基质贴附非常牢固,需要花费较大力气才能使其脱落。要使细胞脱落,可以采用拍掌的动作快速振摇一下细胞培养瓶。为了避免污染,进行此操作前必须盖紧盖子。

三角细胞摇瓶

细胞摇瓶

5、悬浮培养:一些昆虫细胞系可能需要一定的过程来适应悬浮培养。进行细胞悬浮培养时无需更换培养基,定期传代时需要吸出细胞悬液,然后加入适量培养基,将细胞稀释到适当的密度。添加新鲜培养基后可使细胞营养素达到完全补充。

以上是细胞培养瓶培养昆虫细胞需要注意的五个方面,此外还要注意尽量不要剧烈摇晃细胞培养瓶,避免对细胞造成损伤。
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