细胞培养瓶是细胞初级培养阶段经常会用到的一种耗材，它多用于贴壁细胞的培养。在细胞生长到一定程度后，就需要对瓶内的细胞进行传代，具体如何操作呢？

T75细胞培养瓶

1、去掉原来细胞培养瓶中的培养基，加入3-4 ml PBS洗1-2次；

PETG血清培养基瓶

2、加入trypsin-EDTA溶液(1ml/25cm2,2ml/75cm2)，37℃作用数分钟，于倒立显微镜下观察，当细胞将要分离而呈现圆粒状时，吸掉trypsin-EDTA溶液。(若不移去trypsin-EDTA，则在trypsin-EDTA作用后，加入适量含血清之新鲜培养基终止trypsin作用，离心后再吸掉上清液。

T25细胞培养瓶

3、轻拍拼字使细胞自瓶壁脱落，加入适量之新鲜培养基，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，混和均匀后，依稀释比例转移至新的瓶中，以正常培养条件培养。