细胞培养瓶是细胞初级培养阶段经常会用到的一种耗材,它多用于贴壁细胞的培养。在细胞生长到一定程度后,就需要对瓶内的细胞进行传代,具体如何操作呢?
1、去掉原来细胞培养瓶中的培养基,加入3-4 ml PBS洗1-2次;
2、加入trypsin-EDTA溶液(1ml/25cm2,2ml/75cm2),37℃作用数分钟,于倒立显微镜下观察,当细胞将要分离而呈现圆粒状时,吸掉trypsin-EDTA溶液。(若不移去trypsin-EDTA,则在trypsin-EDTA作用后,加入适量含血清之新鲜培养基终止trypsin作用,离心后再吸掉上清液。
3、轻拍拼字使细胞自瓶壁脱落,加入适量之新鲜培养基,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,混和均匀后,依稀释比例转移至新的瓶中,以正常培养条件培养。
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