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细胞摇瓶培养液体菌种的要点
发表日期:2021-12-02

液体菌种是用液体培养基培养而成的菌种它具有菌种生产周期短、菌龄整齐一致、接种方便、适宜于工厂化生产等优点,因而受到了广大栽培者的欢迎。细胞摇瓶是培养液体菌种时需要用到的一种耗材,在培养时需要注意以下要点:

细胞摇瓶培养液体菌种的要点

三角细胞摇瓶500ml


    1.培养基的配制 按配方称好各种成分,装入容器中,加水溶解后,分装入三角瓶中,一般250~300mL细胞摇瓶装50mL培养液,500mL三角瓶装100mL培养液,塞上棉塞,用报纸包扎;也可用8层纱布做成8cm×8cm的瓶塞封口,外面用牛皮纸封口。
    2.灭菌一般采用高压灭菌方法,灭菌要求121℃、30min。取出冷却到30℃左右,放人无菌室或接种箱内备用。
    3.接种 按无菌操作要求每瓶接入2~3cm2的斜面菌种一块,每支斜面菌种可接4~5瓶。接入的菌种稍带点培养基为好,能使其浮在培养基的表面,接种后用原塞瓶口的纱布展开后盖在瓶口,并用线绳扎牢。

细胞摇瓶培养液体菌种的要点

高效摇瓶5L

    4.培养接种好的菌种瓶可置于摇床上培养,也可置于24~26℃恒温下静置培养48h后,待气生菌丝延伸到培养液中后再进行振荡培养。往复式摇床的振荡频率为80~120r/min,旋转式摇床的频率为150~220r/min,摇床培养3~4d即可。培养结束时,因菌种不同,培养液出现不同色泽,如平菇、金针菇的培养液呈浅黄色;香菇、猴头菇的培养液呈红棕色,并有菇香味;木耳的培养液呈褐色,黏稠有香甜味。培养液经检测,无杂菌污染,菌丝干重达10g/L,菌丝球直径在1~2mm时,方可用于生产或进一步扩大培养。
    5.二级液体菌种制作 二级液体菌种培养基的制作同一级液体菌种,培养容器要大些,装量不超过3500mL。灭菌冷却后,将已经发酵好的一级液体菌种按5%~10%的比例接入5L细胞摇瓶中,置摇床上培养,转速要适当慢些。经过一定时间的振荡培养,就可得到菌球均匀分布、发酵液清澈透明的液体菌种。

细胞转瓶2L

   综上所述,利用细胞摇瓶培养液体菌种时按照以上方法操作,在过程中注意控制温度、摇床震荡频率等因素,确保培养效果。

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