您好!欢迎访问洛阳富道生物科技有限公司官方网站!
富道生物耗材
专注高端生物耗材
助力全球生命科学发展
咨询电话
400-160-1996
您现在的位置: 首页 » 新闻动态 » 行业新闻 » 正文
细胞培养板在细胞免疫荧光实验中的应用
发表日期:2021-10-08


细胞免疫荧光实验是标记免疫技术发展较早的一种,它可以观察组织或细胞内抗原物质的定位,以及一些特殊信号分子蛋白的出核/入核的定位变化。在这项实验中,细胞培养板是一种关键性的耗材。其实验步骤如下:

细胞培养板在细胞免疫荧光实验中的应用

96孔细胞培养板

第一天: 

1. 在细胞培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次,每次3min; 

2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min, PBS浸洗玻片3次,每次3min; 

3. 0.5%Triton X-100( PBS配制 )室温通透20min(细胞膜上表达的抗原省略此步骤); 

4. PBS浸洗玻片3次,每次3 min,吸水纸吸干PBS,在玻片上滴加正常山羊血清,室温封闭30min; 

5. 吸水纸吸掉封闭液,不洗,每张玻片滴加足够量的稀释好的一抗并放入湿盒,4℃孵育过夜; 


细胞培养板在细胞免疫荧光实验中的应用

24孔细胞培养板

第二天: 

6. 加荧光二抗:PBST 浸洗爬片3次,每次3min,吸水纸吸干爬片上多余液体后滴加稀释好的荧光二抗,湿盒中20-37℃孵育1h,PBST浸洗切片3次,每次3min;注意:从加荧光二抗起,后面所有操作步骤都尽量在较暗处进行。

7. 复染核:滴加DAPI避光孵育5min,对标本进行染核,PBST 5min×4次洗去多余的DAPI; 

8. 用吸水纸吸干爬片上的液体,用含抗荧光淬灭剂的封片液封片,然后在荧光显微镜下观察采集图像。


细胞免疫荧光实验

以上是细胞免疫荧光实验的具体步骤,用于这种实验的细胞培养板一般都要经过特殊的TC处理,以满足细胞的贴壁需求。此外还要注意,接种细胞时要轻柔混匀,防止细胞局部生长过密,影响实验进程。

推荐产品
网站首页 细胞培养耗材 细胞工厂 细胞摇瓶 SUS一次性耗材 关于富道 联系我们
首页 电话 联系