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怎样检测细胞工厂中的活细胞数量
发表日期:2021-08-25


细胞工厂是一种一层或多层结构的细胞培养耗材,在细胞培养过程中,我们需要及时掌握细胞的生长状态,才能进行下一步的进程操作。检测活细胞数量可以采用台盼蓝染色法进行,具体操作方法如下:


 1. 对于贴壁细胞而言,吸出培养基,加入消化液,在孵箱中消化适宜时间。细胞变圆后,加入等量或大于消化液体积的培养基终止消化。离心后,用培养基制成细胞悬液;

 2. 取0.5ml台盼蓝溶液、0.3mlPBS和0.2ml的细胞悬液,充分混匀。然后将混合液放置1-2min。用毛细吸管或10ul的小枪头吸取少量混合液,注入血细胞计数板;

3. 至少计数1000个细胞,并计数其中的染色细胞数量;


10层细胞工厂

4. 用超纯水和75%乙醇清洗计数板和盖玻片;

5. 正常细胞是不会被染上颜色的,只有细胞死亡后,细胞膜通透性变大,台盼蓝进入细胞内,细胞呈蓝色。混合液不能放置太长时间,否则正常的活细胞也会摄取染料,影响计数准确性;

6. 细胞活力(%)=(总细胞数-着色细胞数)/总细胞数*100;

7. 台盼蓝染色同细胞计数法一样,误差性较大,只能检测早期细胞凋亡水平,不能明显表现出对照组和实验组的差异性。


40层细胞工厂

在细胞工厂培养细胞的过程中,总有一些因为各种原因死亡的细胞,掌握活细胞数量及细胞活力,是细胞培养试验中的关键操作,也是确保试验进程的有效途径。

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