我们在使用细胞摇瓶来培养细胞时总会遇到各种各样的问题，富道细胞今天跟大家分享一下我们在使用细胞摇瓶培养细胞时的注意事项。

悬浮细胞常规推荐接种密度：3-5×105cell/mL，生长到2×106cell/mL左右可继续传代；该密度建议为理论值，实际按照每个细胞特性有波动；培养悬浮细胞需要稳定的生长环境，少操作，少观察，更有利于细胞生长；

不建议将聚团的细胞频繁吹散，等待密度高和状态改善时，细胞会自行散开；部分细胞聚团生长为特性，吹散不利于生长，请注意查看相关培养说明；有些细胞本身就是聚团生长(NK92,NK92MI,JURKAT,H209,ATT20等)，有些细胞本身就形态不圆（H9等），为正常现象，无需特殊处理；

竖瓶培养可以促进细胞生长，但由于拿出来观察时都是横瓶，观察久了细胞会贴到底部，观察完再次竖起来就会有细胞挂在瓶底部，而细胞没有培养基滋润很快就会死掉并残留在壁上，从而导致养着养着细胞越来越少，贴壁细胞越来越多；因此，在培养瓶竖置操作时需注意吹下细胞摇瓶底部的细胞，避免细胞残留。