我们在使用细胞摇瓶、高效摇瓶多用于培养悬浮细胞,由于悬浮细胞大多胞体呈圆形,不贴于支持物上,呈悬浮生长,容易大量繁殖,且相对于贴壁细胞少了消化这一步骤,但是我们会常遇到细胞聚团、细胞生长慢或不生长、细胞发生贴壁这三种情况。
当我们在使用细胞摇瓶培养细胞时遇到细胞聚团时,我们需要知道的是少量细胞聚团、呈葡萄串状,属于正常现象,特别是细胞密度较低时,易出现这种情况。通过静养(少操作,少观察) 、补加血清(5%)等方式,让细胞密度增高逐渐适应环境后可以恢复正常。还有我们需要知道的时血清的批间差也会导致这种情况,也可以选择换一种血清。
而我们在使用细胞摇瓶来培养细胞时遇到细胞生长慢或者不生长的情况时也不要慌,悬浮细胞有密度依赖性,在高密度下状态比较好,低密度时状态较差,所以传代比例要控制,细胞状态不好时,传代可以不用离心法,而是补液或者半换液的方式,以避免离心损失细胞。
而我们在使用细胞摇瓶培养时发现摇瓶内细胞发生了贴壁,这可能是因为细胞培养瓶静置时间太长,细胞沉底后会出现少量贴壁现象,但这种贴壁非常松,吹一下或拍一下细胞就可以起来;此现象为正常现象,无需特殊处理。
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