细胞工厂培养细胞的时候需要用到各种溶液,如培养基、缓冲液等,其中胰酶也是非常重要的一种溶液。虽然每种细胞的培养条件各不相同,但是,在细胞传代过程中都少不了这个步骤—胰酶消化。那么,在使用胰酶消化细胞的时候,我们应该注意什么呢?
胰酶是一种蛋白酶,酶切位点是肽链的Lys或Arg两个残基的羧基端肽链,通过在特定位置上降解蛋白,使细胞膜上与培养皿壁结合处蛋白降解,从而使两者分离。这时,细胞由于自身内部细胞骨架的张力以及培养液表面张力可成为球形。
胰酶适用于消化细胞间质较少的软组织和传代细胞,如胚胎、上皮、肝、肾等组织,但对纤维性组织和较硬的癌组织效果较差。胰酶的消化效果主要与pH值、温度、胰酶浓度、组织块大小和硬度有关。
在使用胰酶消化细胞工厂中的细胞时,我们一定要控制要消化时间,一般肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙状移动就可以了,就应该停止消化。此外,如果使用了胰酶,细胞还是成团,可能是消化时间不够、胰酶的消化浓度不够、细胞密度过高或者使用了过期胰酶。
综上所述,使用胰酶消化细胞工厂中的细胞时需要注意控制消化时间,使用前观察胰酶是否过期,避免因为胰酶过期影响细胞生长状态。
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