俗话说“知己知彼百战不殆”,在细胞培养过程中我们经常会遇到各种各样的污染,真菌污染就是常见的一种。那么,我们该如何识别细胞工厂中的真菌污染呢?发现真菌污染后又该如何应对呢?
真菌污染非常常见,污染细胞的对位烟曲霉、黑曲霉、毛霉菌、白念珠菌、酵母菌、孢子霉等。细胞受到真菌污染后会在培养液中形成白色或者浅黄色漂浮物。一般肉眼可见,较易被发现,短期内培养液多不混浊,倒置显微镜下可见于细胞之间纵横交错穿行的丝状、管状、及树枝状菌丝,并悬浮飘荡在培养液中。
很多菌丝在高倍镜可见到有链状排列的菌珠;念珠菌或酵母菌形态呈卵形,散在细胞周边和细胞之间生长。镜下看时,要将细胞工厂用酒精棉球擦干净,以防止与外部生长的菌丝相混淆。真菌污染后,细胞生长变慢,但最后由于营养耗尽及毒性作用而使细胞脱落死亡。
由于真菌和细胞的生理特性类似,通常不在培养基中添加相应的抗生素进行预防。细胞一旦发现被真菌污染,应立即查找污染源,进行清理消毒。在无法控制的时候,需对整个培养室进行全面消毒。
总的来说,真菌生长比较慢,不如细菌容易被发现,一旦发现细胞工厂中的细胞感染真菌,基本就比较严重了,细胞很难救活。所以平时我们要以预防为主,严格执行无菌操作。
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