血清是培养细胞时常用的营养物质,血清的质量直接关系到细胞的生长状态。有时候我们会发现血清瓶中有有絮状的沉淀物,其实出现这一情况不必过分紧张,这些沉淀物主要是以下三类物质:
1、纤维蛋白:它是经常出现的较大的沉淀物,可以达到1-2mm,可以用肉眼观察到。因为血清都是在低温下进行收集和快速处理的,一些纤维蛋白原(可溶性的形成絮状纤维蛋白的前体)在处理过程中仍然处于溶解状态,当经过后的过滤分装后,就会在血清瓶中凝结出现纤维蛋白沉淀。
2、磷酸钙:它也是常见的一种沉淀物,通常会使血清出现浑浊,并且在37°C培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点,这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动,因此经常被误认为是微生物污染。
3、胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质:他们也是血清中出现沉淀物的常见原因。
以上是血清瓶中常见的三种沉淀物,一般情况下,沉淀物不会影响细胞培养,但如果细胞对于营养物质有特殊需求,沉淀物中的成分不能被细胞吸收,可能会引起细胞长势较差。如果要除去血清中的血清,可以将血清分装至无菌离心管中,400g 离心,留上清即可。
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