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细胞转瓶培养细胞的操作方式
发表日期:2023-01-26

我们在使用细胞转瓶时都是将其固定在支加上,倾斜度为5°~10°左右,或将转瓶放在一排排转轴之间,使转瓶随着转轴以每小时6~12 转缓慢转动。

细胞贴附于细胞转瓶壁四周,细胞贴壁和生长只有一个表面面积,经转动一方面使培养液流动,利于细胞吸收营养和进行代谢,一方面使细胞有机会接触气体,有利于细胞呼吸和发生氧化还原作用,有利于细胞生长繁殖。

细胞转瓶内保持有相当大的上方空间,以维持合适的氧和pH 水平,通过转动可使细胞交替接触培养液和空气,营养可被充分利用。若需增加细胞产量,除可在增加转瓶的数量和容积外,使瓶直径尽可能小,此时表面面积可因直径或长度的倍增而成倍增加。

转瓶培养也可使用灌注培养系统,因此系统需要错综复杂回旋的可连续供应的管道进入瓶内,这是一种昂贵的选择。

细胞转瓶培养细胞的操作方式_富道细胞

我们在使用细胞转瓶时可按照以下操作步骤:加入适量生产培养液于转瓶中。加入所培养的细胞。在37℃下,以12转/小时,转动2小时,使细胞均匀贴壁。减少转动速度至5 转/小时并连续培养。在倒置显微镜下使用长焦距物镜检查细胞。在细胞生长至明显汇合时(5~6天),移出培养液,加入0.25%胰蛋白酶,并滚动转瓶以收获细胞。洗去胰蛋白酶,加入新鲜培养基,可转入扩大再培养。为了增加表面积,有人将转瓶表面制成带皱纹的表面或插入多层隔板。以增加表面积。当然这是其中一种的培养方式,我们科研者在使用细胞转瓶来培养细胞时也需要根据自身培养细胞来调整。


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