细胞污染是令许多实验人员非常头疼的事情,轻则影响细胞生长,严重了必须丢弃细胞重新培养,严重影响试验进程。其实,细胞摇瓶培养细胞时,如果注意操作,有些污染是可以避免的。
1.实验用品防止污染。细胞培养所用试剂、细胞摇瓶、器材的清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌要仔细,并在无菌实验检测阴性后才能使用。操作室及剩余的无菌器材要定期清洁、消毒、灭菌。
2.操作过程防止污染。穿着容易起静电或吸附灰尘的衣物必须更换为白大褂后才能进入细胞间。
3.实验开始前需要确定戴的手套没有问题,只要接触过生物安全柜之外的物品,必须及时对手套进行消毒。
4.进入细胞培养间后关好门,坐下来尽量少走动以免影响生物安全柜的风帘。工作开始前要先用75%酒精棉球擦手和瓶盖。事先要严格检查所用的器材、溶液和细胞,不要把污染品或未经消毒的物品带入无菌室内,更不能随便使用,以免造成大规模污染。
5.细胞操作时动作要轻,必须在火焰周围无菌区内打开瓶口,并将瓶口放在火焰周围简单转动烧灼,注意不要让火焰把塑料瓶口烧化。
6.实验操作时生物安全柜的隔板要尽可能放低,尽量减少谈话,打喷嚏或咳嗽时绝对不能对着工作区,以免造成不必要的污染。
7.细胞摇瓶瓶盖应当倒放在远离自己的地方,以避免瓶盖被误操作所污染。
8.不要从敞开的容器口上方经过,以避免衣服上掉落不明物体对细胞的污染。
做到以上这些,可以在很大程度上避免细胞摇瓶内的细胞出现污染。此外,操作时要注意及时更换习惯、移液枪枪头、移液管等耗材,切勿一根管子做到底,一旦发现接触了非洁净或者无法确定洁净的物品必须直接丢弃。
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