细胞的体外培养需要特定的环境,如无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等。细胞接种存活率是衡量细胞生存能力的重要细胞,那么,我们怎样利用细胞培养瓶检测这一指标呢?
细胞接种存活率又称细胞贴壁率。它是细胞被制成分散的悬液后,以低密度(2~5个细胞/cm2)被接种到底物上,贴壁并能存活生长形成细胞小群(克隆)的细胞百分数值,用以表示细胞的生存能力和细胞群的活力。基本步骤如下:
(1)取对生长期细胞,用消化法制成细胞悬液,计数后按检测细胞生长曲线的接种细胞的原则,将细胞接种于细胞培养瓶(浓度相对高些)。接种12~15瓶。
(2)每2小时取出一瓶细胞,倒掉培养液,然后加入胰酶消化已贴壁细胞,计数已贴壁细胞,用下面公式逐个计算每个时间上的贴壁率。每2小时一次,共观察24小时即12。接种存活率%(贴壁率)=(贴壁存活细胞数/接种细胞数)×100%。
细胞培养瓶是贴壁类细胞培养常用的容器,细胞接种存活率仅仅是衡量细胞生长状况的一方面,其他还包括克隆形成率、细胞分裂指数等,这些都可以直接反映细胞的状态。
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