在培养细胞时,我们经常会发现细胞培养瓶的内部有黑点,这些黑点很有可能是受到污染而出现的,那么,如果瓶内出现黑点,我们该如何处理呢?
瓶子内部出现黑点,我们首先要判断这些黑点是不是污染,可以通过黑点的大小、形状、运行速度等方面进行判断,如果判定黑点是污染,我们可以参照以下方法进行处理:
如果是悬浮细胞:手机细胞上清慢速离心(500-600 rpm/min,5-6 min)并更换新的细胞培养瓶。如果是贴壁细胞:将细胞用PBS润洗2-3遍,洗的时候,轻轻拍打瓶体,让贴壁不牢的碎片和颗粒脱落,然后再弃去PBS,消化时先加低浓度的胰酶如0.05%胰酶消化1 min左右,让细胞间隙中的颗粒和碎片脱落下来,去掉低浓度胰酶,然后正常消化细胞,将收集的细胞悬液慢速离心(500-600 rpm/min,5-6 min)并更换新的培养瓶,并可以尝试适当增加血清浓度进行培养。
另外,如果细胞培养瓶培养液变浑浊,则说明细菌污染已经比较严重,请及时将细胞处理后丢弃。避免出现黑点要从培养基PH值、水质、器皿的清洁等多方面进行注意,在消化细胞的时候要掌握好时间,防止消化过度产生细胞碎片。
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