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细胞摇瓶培养液中的PH值变化太快怎么办
发表日期:2023-01-07

合适的PH值是细胞生长的必要条件,在利用细胞摇瓶培养细胞时,我们有时候会遇到培养液PH值变化太快的情况,这样对细胞的生长非常不利。那么,这是什么原因造成的,我们又该如何应对呢?

1、二氧化碳张力不对:按培养液中NaHCO3浓度增加或减少培养箱内CO2 浓度,2.0 g/L到3.7 g/L浓度NaHCO3对应CO2浓度为5%到10%。或者改用不依赖CO2培养液。

2、瓶盖拧得太紧:松开瓶盖1/4圈。

3、NaHCO3 缓冲系统缓冲力不足:加HEPES缓冲液至10到25 mm 终浓度

细胞摇瓶培养液中的PH值变化太快怎么办-富道细胞

4、培养液中盐浓度不正确:在CO2培养环境中改用基于Earle’s盐配制的培养液,在大气培养环境中培养改用Hank’s盐配制的培养液

5、细菌、酵母或真菌污染:如果细胞摇瓶中的培养液受到污染,也会导致PH值的变化,这个时候就需要视污染情况而定,选择丢弃培养物或用抗生素除菌。

大多数细胞适于在pH7.2~7.4条件下生长,低于pH6.8或高于pH7.6对细胞有害,甚至退变或死亡。各种细胞对pH值的要求不尽相同,一般原代培养细胞对pH值的碱性的耐受比对酸性的耐受差,偏酸的环境比偏碱的环境对细胞生长有利。如果细胞摇瓶培养液中的PH值变化太快,我们需要分析具体原因,然后再进行下一步的操作。

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