合适的PH值是细胞生长的必要条件，在利用细胞摇瓶培养细胞时，我们有时候会遇到培养液PH值变化太快的情况，这样对细胞的生长非常不利。那么，这是什么原因造成的，我们又该如何应对呢？

1、二氧化碳张力不对：按培养液中NaHCO3浓度增加或减少培养箱内CO2 浓度，2.0 g/L到3.7 g/L浓度NaHCO3对应CO2浓度为5％到10％。或者改用不依赖CO2培养液。

2、瓶盖拧得太紧：松开瓶盖1/4圈。

3、NaHCO3 缓冲系统缓冲力不足：加HEPES缓冲液至10到25 mm 终浓度

4、培养液中盐浓度不正确：在CO2培养环境中改用基于Earle’s盐配制的培养液，在大气培养环境中培养改用Hank’s盐配制的培养液

5、细菌、酵母或真菌污染：如果细胞摇瓶中的培养液受到污染，也会导致PH值的变化，这个时候就需要视污染情况而定，选择丢弃培养物或用抗生素除菌。

大多数细胞适于在pH7.2~7.4条件下生长，低于pH6.8或高于pH7.6对细胞有害，甚至退变或死亡。各种细胞对pH值的要求不尽相同，一般原代培养细胞对pH值的碱性的耐受比对酸性的耐受差，偏酸的环境比偏碱的环境对细胞生长有利。如果细胞摇瓶培养液中的PH值变化太快，我们需要分析具体原因，然后再进行下一步的操作。