今天富道细胞跟大家讲述一下如何利用细胞培养瓶进行细胞传代的操作方式。
首先我们要先吧准备传代的细胞在镜下观察,需要挑选一些生长状态良好的,细胞界限情绪,具有立体感,形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。
然后需要配置细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH 培养液100ml 内,加入灭活小牛血清10m1,庆大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸氢钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS 洗液冲洗细胞表面1-2 次,每次10m1,弃去洗液,向细胞培养瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞培养瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。
细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1 细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于细胞培养瓶中,再加入10m1 细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4 天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
这就是富道细胞为大家描述的如何利用细胞培养瓶方面进行细胞传代的操作方式。
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