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细胞培养瓶内细胞的消化步骤
发表日期:2023-01-04

细胞培养瓶多用于贴壁细胞的培养,当细胞生长到一定程度后,需要将其消化下来,进行下一步的传代或其他操作。由于是贴壁细胞,因此消化细胞时需要借助消化酶让细胞从瓶壁脱落,具体的操作步骤如下:

1、吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。

2、加入少量胰酶细胞消化液,略盖过细胞即可,根据胰酶效率差异可以增加惑减少胰酶用量。室温放置30秒至2分钟(不同的细胞消化时间有所不同)。

细胞培养瓶内细胞的消化步骤_富道细胞

3、显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察细胞培养瓶底部发现细胞的形态发生明显的变化呈白茫状;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。

4、此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。

以上是细胞培养瓶内细胞的消化步骤,在操作的时候我们要注意控制好消化时间,避免因为消化时间不足,未达到相应的消化效果;或因为消化过度,对细胞造成损伤,影响后期的细胞培养。

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