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利用冻存管进行细胞冻存实验
发表日期:2022-12-19

今天富道细胞来跟大家分享一下如何利用冻存管进行细胞冻存实验,细胞冻存是指对体外培养的细胞通过加入液氮进行保护。以维持其各种生物特性,减少培养器皿、培养液等的消耗

细胞的冻存实验的基本原理是利用液氮的低温特性以及二甲亚砜(DMSO)或甘油这两种无毒性的物质进入细胞中,使细胞内冰点下降,并可提高细胞膜对水的通透性,配合以缓慢冷冻的方法,可使细胞内的水分逐步地渗透出胞外。那我们知道其原理之后就跟大家分享一下其具体步骤吧:

利用冻存管进行细胞冻存实验_富道细胞

首先我们依照传代的方法用 0.25% 胰蛋白酶液对处于对数生长期的单层细胞进行消化。收集消化细胞于离心管中,800~1000 r/min 离心 5 min。然后弃上清液,加入适量冻存液,用吸管吹打细胞制悬,调整细胞密度为 5 x 106~1 x 107 个/ml。后续将每个冻存管分装细胞悬液 1 ml,旋紧冻存管的盖,并用蜡膜封严。在冻存管上标明细胞的名称、冻存时间、冻存人名等。然后将将冻存管置于如下条件下逐步加以冻存:4 ℃,1 h→- 20 ℃,2 h→- 85 ℃,2 h→液氮。

以上步骤就是富道细胞来跟大家分享一下如何细胞的利用冻存管进行细胞冻存实验的方法了,希望对大家有所帮助。

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